A-level 生物學/生物學基礎/蛋白質結構與功能
遺傳分子必須能夠攜帶製造新細胞的指令,並具有被複制的能力,每次複製時都完全相同,並且可以複製很多很多次。
DNA(脫氧核糖核酸)和 RNA(核糖核酸)都是大分子。它們也是多核苷酸 - 由許多類似的稱為核苷酸的分子組成的聚合物。DNA 和 RNA 都可以簡單地稱為核酸。核苷酸透過縮合反應連線在一起。
核苷酸是有機化合物,由三個連線的結構組成:一個含氮鹼基、一個戊糖和一個磷酸基。DNA 僅包含四種核苷酸 - 腺嘌呤、胸腺嘧啶、鳥嘌呤和胞嘧啶。RNA 包含相同的四種,除了胸腺嘧啶被尿嘧啶取代。連線的糖是核糖或脫氧核糖,唯一的區別是脫氧核糖在其分子中少了一個氧原子。鹼基有兩種型別 - 嘌呤和嘧啶 - 你只需要知道腺嘌呤和鳥嘌呤是嘌呤鹼基,以及嘌呤鹼基更大即可。

為了形成 DNA 和 RNA,這些核苷酸中的許多以多核苷酸鏈的形式連線在一起。這種多核苷酸鏈的結構見下圖:[1]。如你所見,它由交替的糖和磷酸鹽形成,含氮鹼基向側面突出。DNA 分子只是兩個這樣的鏈並排排列,以相反的方向執行,由氫鍵連線在一起。
在 DNA 分子中,兩個嘌呤鏈之間的空間不足以彼此相對,因此兩條鏈中只有一條可以是嘌呤鹼基。然而,這不是問題,因為鹼基是配對的 - **互補鹼基配對** - 腺嘌呤總是與胸腺嘧啶配對,胞嘧啶總是與鳥嘌呤配對(A-T,C-G,在 RNA 中,是 A-U,因為胸腺嘧啶不出現)。DNA 分子形成 3D 螺旋形狀,由氫鍵連線,而 RNA 保持單鏈多核苷酸形式。
右邊的圖相當複雜,但你只需要注意到鹼基之間的氫鍵、糖磷酸骨架和互補鹼基配對 - 對於 A-Level,不需要特定的結構。

為了使 DNA 可行,它必須能夠被完美地複製很多次 - DNA 發現者沃森和克里克建議,DNA 的兩條多核苷酸鏈可以分開,新的核苷酸(正確的、互補的核苷酸)可以沿著每條鏈排列,形成新的 DNA 分子。然後,DNA 分子可以重新纏繞成雙螺旋。這個過程被稱為半保留複製,因為原分子的一半在每個新分子中都得到了保留。
氮是 DNA 的主要成分,有兩種不同的同位素 - 14N 和 15N。14N 是迄今為止最豐富的氮同位素,但含有較重 15N 同位素的 DNA 也能起作用。
由梅塞爾森和斯坦在 1958 年進行的實驗如下;
大腸桿菌,一種無害的細菌,生活在人體消化道中,在含有 15N 的培養基中生長了幾代。由此產生的細胞的 DNA 密度更高(它們更重)。之後,將僅在 DNA 中含有 15N 的大腸桿菌細胞放回 14N 培養基中,並允許一些細胞僅分裂一次,一些分裂兩次、三次或更多次。然後從每組細胞中提取 DNA,並將其放入氯化銫溶液中,然後在離心機中旋轉。DNA 越重,它最終停留的位置就越接近試管底部。僅在 15N 中生長的 DNA 停留在最靠近底部的位置,而那些在 14N 中分裂一次的組的 DNA 停留在純 14N 和純 15N 之間 - 一箇中間組,表明該 DNA 的氮有一半是 14N,一半是 15N。
本節討論 DNA、RNA 和蛋白質的合成方式。
所有細胞活動都是化學反應,所有化學反應都由酶控制 - 那麼什麼控制酶呢?DNA。DNA 為蛋白質編碼,控制製造哪些蛋白質以及製造多少蛋白質。蛋白質由氨基酸鏈組成,蛋白質的結構和功能取決於這些氨基酸的確切序列 - DNA 透過決定氨基酸連線在一起的確切順序來控制這種蛋白質結構。
氨基酸序列由 DNA 分子中核苷酸序列編碼 - 三個鹼基形成一個三聯密碼。每個三聯密碼編碼一個氨基酸(例如,T-T-T,胸腺嘧啶-胸腺嘧啶-胸腺嘧啶代表氨基酸賴氨酸),並且總是以相同的方向讀取。
基因是 DNA 分子的一部分,它僅編碼一個多肽,僅在人類中,估計有 140,000 個基因。基因組是單個細胞中的全部資訊,即該生物體的基因組。
轉移 RNA(tRNA,下圖)是細胞質中的遊離分子 - 在圖中標記為 'a' 的位置是反密碼子,三個未配對的鹼基,因此每個 tRNA 都會與特定的氨基酸結合。這些氨基酸也存在於細胞質中,並在酶的控制下在圖中 β 點處結合。

過程
- 1. 在細胞核內,DNA 雙螺旋解開以暴露一個含氮鹼基序列。
- 2. 轉錄 - 將該鏈的副本製成信使核糖核酸(mRNA),在轉錄後,該鏈透過核膜中的一個孔從細胞核中移出,進入細胞的主體,在那裡發生蛋白質合成。
- 3. mRNA 與核糖體的小亞基結合。轉移 RNA(tRNA)將遊離氨基酸帶到核糖體。
- 4. tRNA 上的反密碼子識別 mRNA 鏈上的密碼子(從細胞核中的 DNA 鏈複製而來),核糖體將氨基酸新增到正在生長的多肽鏈中,將其從 tRNA 中切斷。這個過程被稱為翻譯。
- 5. 隨著多肽鏈的生長,它會摺疊形成蛋白質。
參見圖片:[2]
自1950年我們首次確定蛋白質合成和半保留複製以來,我們已經發展到可以改變和插入細胞DNA的水平。工業生產胰島素就是一個很好的例子。
糖尿病最常見的原因是患者的胰腺無法產生胰島素,I型糖尿病患者(胰島素依賴型糖尿病)需要定期注射胰島素才能生存。這種胰島素以前來自動物的胰腺,例如牛或豬 - 這種方法昂貴,風險更大,因為胰島素不是人胰島素,而且人們有倫理上的反對。因此必須做些什麼 - 科學來拯救。胰島素基因被提取出來,插入細菌載體中,複製並提取,詳情如下。
為了使用胰島素基因(一個相對較小的基因),它首先必須被分離 - 而且無法直接進行,所以提取了攜帶胰島素編碼的mRNA。然後將這種mRNA鏈與一種叫做逆轉錄酶的酶一起孵育 - 一種逆轉轉錄的酶,從RNA製造DNA,製造兩條鏈,創造一個編碼胰島素的DNA雙螺旋基因。為了使這些胰島素基因能夠粘附到其他DNA上,它們被賦予了粘性末端 - 在多核苷酸鏈的每一端有一小段鳥嘌呤。
為了讓大腸桿菌複製胰島素基因,因為它來自人類,必須使用載體,在這種情況下,載體被稱為質粒。質粒是存在於原核細胞中的環狀DNA,可以將人類DNA新增到其中。質粒透過用酶溶解其細胞壁,然後離心分離從細菌中提取 - 將較小的質粒留在頂部。這些質粒被提取出來,用限制性內切酶切割並新增粘性末端 - 這次是胞嘧啶末端,以便可以使用一種叫做DNA連線酶的酶將DNA鏈的鳥嘌呤末端連線起來。產物被稱為重組DNA。
然後將質粒與大腸桿菌混合 - 並非所有細菌都能攝取質粒,而那些沒有攝取質粒的細菌會被抗生素殺死。那些攝取質粒的細菌也獲得了抗生素抗性,因此只有那些帶有質粒的細菌才能存活下來。這些基因修飾的細菌被大規模培養,分泌胰島素,胰島素被提取和純化,然後可以被糖尿病患者使用。
基因工程還有許多其他用途 - 我們已經學會將基因插入任何生物體,我們甚至在基因治療領域取得了成功 - 用好的基因替換有缺陷的基因,這可以用來治療遺傳性疾病。
然而,患有血友病的人們從一種叫做人凝血因子VIII的蛋白質中獲得了巨大的幫助,這種蛋白質由幾家公司透過基因修飾的倉鼠細胞生產。血友病是一種血液無法凝固的疾病,這種蛋白質使血液凝固 - 這些患者確實需要定期注射人凝血因子VIII。它被認為比來自捐獻血液的重組DNA更好,因為後者存在感染風險。