蛋白質組學/蛋白質樣品製備/色譜前處理
外觀
- 溶解和溶液製備
對於高效液相色譜 (HPLC),樣品溶液 (流動相) 不含顆粒物質非常重要。由於 HPLC 柱的敏感性以及所涉及的極端壓力,這些汙染物會造成極大的損害,並且蛋白質樣品製備|汙染物消除#汙染物消除非常重要。
- 親和色譜的重組技術
親和色譜是一種蛋白質分離技術,其中使用對特定蛋白質具有親和力的底物作為色譜柱的固相。一種高度特異性的技術是使用重組技術分離從重組 DNA 表達的蛋白質。如果將基因插入克隆載體中以用於發酵大量蛋白質,則可以改變基因以在蛋白質中包含額外的氨基酸。然後,該後續序列可以用作固定相底物的結合位點。兩個例子是組氨酸殘基的新增,它們與某些金屬離子共價結合,以及谷胱甘肽-S-轉移酶蛋白的新增,它們將與谷胱甘肽結合。http://en.wikipedia.org/wiki/Affinity_chromatography
含有寡組氨酸結構域的細菌表達多肽的單步純化。 基因。1992 年 2 月 1 日;111(1):99-104。
具有酶活性的谷胱甘肽-S-轉移酶 (pGEX) 融合蛋白的溶解和純化。 分析生化。 1993 年 4 月;210(1):179-87。