蛋白質組學/蛋白質分離 - 色譜/陰離子交換
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雖然陰離子交換劑所涉及的樹脂帶正電,但陰離子交換劑之所以得名,是因為它們對陰離子的親和力。為了有效地結合蛋白質,系統中緩衝液的pH值必須大於目標蛋白質的等電點,因為蛋白質在其等電點以上帶負電。
陰離子交換劑可以分為弱型或強型。弱型交換劑上的帶電基團是弱鹼,由於去質子化,在高pH值下很容易失去其電荷。另一方面,強型陰離子交換劑由帶電基團組成,這些基團是強鹼。強型陰離子交換劑能夠在可變的pH範圍內保持其正電荷,而弱型陰離子交換劑往往隨著pH值的升高而失去其電荷。陰離子交換劑的例子包括強型陰離子交換劑Q(季銨樹脂)和弱型陰離子交換劑DEAE(二乙氨基乙烷)。
通常,色譜法使用pH值在7到10之間的緩衝液進行,並從僅含有該緩衝液的溶液到含有該緩衝液和1M NaCl的溶液進行梯度洗脫(Res1)。鹽(在溶液中)與固定相競爭結合,從而將蛋白質從其結合狀態釋放出來。蛋白質的分離是因為競爭結合所需的鹽量隨蛋白質外部電荷的不同而不同。陰離子交換色譜法已成功用於粗漿的純化、蛋白質間的分離、蛋白質的濃縮以及蛋白質製劑中帶負電荷的內毒素的去除(Res1)。
- Proteinchemist.com 離子交換色譜法 (IEC)
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