蛋白質組學/蛋白質分離 - 色譜法/陽離子交換劑
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陽離子交換劑因其吸引陽離子或帶正電荷的粒子的能力而得名。在這種情況下，色譜系統的樹脂帶負電荷，如果緩衝液的 pH 值小於蛋白質的獨特等電點，蛋白質就會結合。
與陰離子交換劑一樣，陽離子交換劑也可以分為弱型和強型。弱陽離子交換劑由弱酸組成，隨著 pH 值的降低，其電荷逐漸消失，而強陰離子交換劑由強酸組成，能夠在較寬的 pH 值範圍內保持其電荷。羧甲基常用於弱陽離子交換劑，而磺丙基則廣泛用作強陽離子交換劑(Res1)
選擇正確的樹脂和緩衝液至關重要，因為它決定了蛋白質與樹脂的結合特性。在陽離子交換中，目標蛋白質需要帶正電荷才能與帶負電荷的固定相結合。假設我們有一組以下蛋白質
| 蛋白質 | pI | pH 4.8 釐米 | pH 7.2 釐米 | pH 8 釐米 |
| 碳酸酐酶 | 7.0 | +16.5 | -0.4 | -2.7 |
| 羧肽酶 B | 6.2 | +12.0 | -3.3 | -6.3 |
| 胰凝乳蛋白酶 | 8.0 | +9.0 | +2.7 | 0.0 |
| 溶菌酶 | 9.8 | +14.1 | +7.9 | +6.9 |
- 在 pH 4.8 釐米時，所有蛋白質都將與陽離子交換劑結合，其中碳酸酐酶與固定相結合最牢固。如果在此 pH 值下進行洗脫，蛋白質將按胰凝乳蛋白酶、羧肽酶 B、溶菌酶和碳酸酐酶的順序洗脫。
- 在 pH 7.2 釐米時，碳酸酐酶和羧肽酶 B 將在洗滌中洗脫（在梯度開始之前），然後是胰凝乳蛋白酶，然後是溶菌酶在鹽梯度中洗脫。
- 在 pH 8 釐米時，只有溶菌酶會與固定相結合，其他三種蛋白質將在洗滌中洗脫。
還可以改變溶劑 A 和 B 中的鹽濃度，以便即使帶正電荷，結合較弱的蛋白質也會在洗滌中從柱子上洗脫。例如，如果您將 pH 4.8 釐米修改為在溶劑 A 中含有 0.1 M NaCl，在溶劑 B 中含有 0.2 M NaCl，您會發現結合最弱的蛋白質（胰凝乳蛋白酶）在洗滌中洗脫，而其他三種蛋白質在梯度中洗脫。
- Craig. P，羅切斯特理工學院，設計陽離子交換分離