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蛋白質組學/蛋白質分離 - 色譜/超高效液相色譜

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超高效液相色譜

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   高效液相色譜已被證明在許多科學領域非常有用,但在速度或解析度方面受到限制。超高效液相色譜 (UHPLC) 提高了通量和解析度,主要基於使用更小的顆粒進行分離。

   優點主要基於液相色譜的基本理論。一般而言,提高分離效率也會提高其解析度。由於效率和最佳流速都與顆粒尺寸成反比,因此減小顆粒尺寸會提高效率和流速。

   例如,顆粒尺寸可以小至 1.7um,而 HPLC 通常使用的顆粒尺寸為 3.5um 或 5um。顆粒必須能夠承受高壓、極端 pH 值,並具有高負載能力以提高效率。色譜方法的其他創新包括高壓溶劑輸送系統,以考慮更小的顆粒尺寸,快速進樣迴圈樣品管理以及具有光纖流通池設計的專用檢測器。

UHPLC 與 HPLC

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下表顯示了超高效液相色譜與高效液相色譜的比較

屬性 HPLC uHPLC
壓力 6000 Psi 100,000 Psi
顆粒尺寸 5μm 1.7μm
流速 毫升/分鐘 升/分鐘
最大解析度 相對較低 相對較高
  1. 沃特世 - 超高效液相色譜
  2. 沃特世 - 色譜實驗室的 UHPLC 新邊界

參考文獻

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  1. Leandro CC、Hancock P、Fussell RJ、Keely BJ。比較超高效液相色譜和高效液相色譜法,透過串聯四極杆質譜法測定嬰兒食品中的優先農藥。 J Chromatogr A。2006 年 1 月 20 日;1103(1):94-101。*
  2. Michael E. Swartz,超高效液相色譜 (UPLC):簡介 www.chromatographyonline.com*
  3. Nicholas Ellor、Frances Goryki、Chung-Ping Yu 使用 UPLC 提高基於 LC/MS/MS 的生物分析測定的靈敏度和通量*
  4. Kate Yu、David Little、Rob Plumb 透過 LC/MS/MS 進行藥物混合物的 HT 定量分析:比較 UPLC/MS/MS 和 HPLC/MS/MS*

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