結構生物化學/克隆用酶

修飾核酸的酶被用於合成、降解、連線和/或去除核酸的部分。克隆酶是在核酸克隆過程中重要的酶。克隆酶的活性包括連線酶、激酶、磷酸酶和RecA蛋白。

例如，DNA連線酶用於將DNA分子連線在一起。在細胞內，鏈的雙端共價連線。當RNA引物在DNA複製過程中取代DNA時，DNA連線酶會封閉空隙。

1. 連線酶用於連線核酸片段，特別是在克隆DNA片段到載體DNA中時。

2. 磷酸酶從核酸鏈中去除5'-磷酸。這可以防止載體降解，從而減少背景菌落的數量，併產生底物，激酶可以在其上連線新的放射性標記磷酸。

3. 激酶在核酸上新增新的磷酸基團。這通常是為了標記核酸片段或合成製備的寡核苷酸。

4. RecA蛋白和AgarACE®酶主要用於在某些克隆過程中保護或促進核酸純化。大腸桿菌RecA蛋白能夠促進同源DNA序列的配對。AgarACE®酶是一種專利的瓊脂糖裂解酶，用於從瓊脂糖凝膠中收穫DNA。