結構生物化學/核酸/RNA/RNA提取
RNA提取是一種從體內組織和樣本中分離和純化RNA的技術。RNA提取的方法有很多。組織細胞記憶體在核糖核酸酶，它會快速降解分離的RNA，從而使提取和純化過程變得複雜。分離和純化的RNA可用於檢測基因表達、生物標誌物、藥物療效等等。
檔案:RNA提取.jpg 首先，使用渦旋混合器將樣本組織在Trizol溶液中均質化。混合速度非常重要，因為只有在高速混合時才能將組織均質化，但是摩擦會產生熱量，這可能會加速RNA降解。向細磨的混合物中加入氯仿以進行液相分離。對於每毫升Trizol試劑，加入0.2毫升氯仿。蓋緊蓋子，劇烈搖動混合物15秒，並在室溫下孵育。在2-8℃下以不超過14,000rpm的速度離心混合物15分鐘。離心後，混合物會分離成三個不同的層：下層紅色的氯仿層、中間層殘留的組織和脂肪層以及上層透明的水層。RNA只存在於水層中。將水層轉移到另一個容器中。使用異丙醇洗滌和沉澱RNA。在每毫升Trizol試劑中加入0.5毫升異丙醇。在室溫下孵育10分鐘，然後在RNA洗脫板中再次離心4分鐘。去除所有上清液，用乙醇再次洗滌RNA。隨後用緩衝液洗滌RNA。確保擦乾任何殘留的酒精，因為它們會降低RNA的質量並促進RNA降解。最後一次洗滌應使用無RNase的水來洗脫分離和純化的RNA。
1. Gottshall, Susan L., Saban Tekin, and Peter J. Hansen. "EXTRACTION AND PURIFICATION OF TOTAL RNA USING TRIzol OR TRI REAGENT." (n.d.): n. pag. Web. 15 Nov. 2012. <http://www.animal.ufl.edu/hansen/protocols/RNA_extraction.htm>.