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蛋白質組學/蛋白質分離- 電泳/毛細管電泳

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毛細管電泳


在毛細管電泳(CE)中,電泳是在充滿緩衝液的小管中進行的,這些小管被稱為細管毛細管。電泳儀器中使用的毛細管通常具有 25 到 100 μm 的內徑。

毛細管的兩端放置在單獨的緩衝液中,連線到高壓電源的電極放置在緩衝液中。其中一個緩衝液容器,通常在陽極處,被樣品取代。樣品透過毛細管作用、虹吸作用或壓力引入毛細管。當電流透過毛細管時,分子被分離。分離的分析物透過毛細管壁被連線到另一端的紫外或熒光檢測器直接檢測。[1]

CE 儀器

流動和分散

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在其他分離技術(如高效液相色譜)中,分離是由壓力驅動的。這會導致流動相與固體表面接觸處的摩擦力。這些摩擦力導致靠近壁的流動相速度為零,而中心的力很大,導致毛細管中出現拋物線流動剖面。這種剖面導致溶質區在透過毛細管時變寬,從而降低分離的解析度。在 CE 中,流動是平坦的,這導致比比較的壓力驅動技術更高的解析度。

視覺化

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CE 的資料輸出是電泳圖,它是遷移時間與檢測器響應的曲線圖。檢測器響應通常是濃度相關的熒光或紫外-可見吸收。電泳圖中顯示了分離分析物的不同峰,取決於不同的保留時間。電泳圖顯示了混合物中陽離子、陰離子和中性溶質的分離峰。

CE 在許多方面都具有優勢。平板凝膠上的高電壓負載產生的熱量會對蛋白質的分離產生負面影響,使用毛細管可以減少這種熱量積累。此外,由於不需要處理凝膠,可以讓人使用液體聚合物進行分離,並且可以在執行之間更換。自動化也更容易在該技術中實現,從而減少了所需時間,併產生了可重複的結果。

另請參閱

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毛細管電泳的維基百科頁面可以在此處找到。
電泳圖的維基百科詳細資訊可以在此處找到。

參考文獻

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^ “毛細管電泳:一種簡單技術。” http://www.beckmancoulter.com/resourcecenter/labresources/ce/cedefinitionmodes.asp


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