蛋白質組學/蛋白質分離 - 色譜法/色譜理論

章節作者：Laura Grell 和 Alexander Butarbutar
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章節修改者：Kai Burnett 和 Dalia Ghoneim
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色譜理論

色譜法是一種分離分子的方法。該方法利用流動相和固定相之間的差異來分離混合物中的不同成分。目標分子可以根據電荷、大小和疏水性等特性與固定相相互作用。

色譜有兩種理論

1. 塔板理論
2. 速率理論

色譜的塔板理論

阿奇博爾德·約翰·波特·馬丁和理查德·勞倫斯·米林頓·辛格創造了色譜的塔板理論。塔板理論描述了固定相和流動相處於平衡狀態。這兩個板之間的分配係數 *k* 可以定義為

$K={\frac {Concentration\ of\ solute\ in\ stationary\ phase}{Concentration\ of\ solute\ in\ mobile\ phase}}$

隨著 *k* 的增加，溶質分離所需的時間也會增加。如果色譜是在固定長度和流速的柱中進行的，則保留時間 $(t_{R})$ 和保留體積 $(V_{r})$ 可以測量並用於確定 *K* 的值。

色譜的速度理論

速率理論由範德姆特提出，用於解釋塔板理論無法解釋的色譜行為。速率理論基於三個因素：路徑相關擴散（A）、縱向擴散（B）和傳質（C）。

A. 路徑相關擴散發生在色譜柱填充不均勻的情況下，因此兩個相同的分析物可能遷移不同，因為其中一個比另一個走得更遠。

B. 縱向擴散是物質從高濃度區域（色譜柱上譜帶的中心）向低濃度區域（同一譜帶的外邊緣）移動的結果。縱向擴散隨著溫度升高而增加。

C. 傳質效應是由物質在固定相和流動相之間達到平衡需要時間這一事實造成的。在平衡時間內，流動相仍在移動。這會導致譜帶變寬。

參考文獻

1. 色譜法 在 維基百科 上