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結構生物化學/DNA重組技術/人工染色體

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一般資訊

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人工染色體是合成染色體,由整合到宿主染色體中的 DNA 片段組成。這些人工染色體被引入宿主細胞進行繁殖,可以用於轉染其他細胞,引入新的 DNA。人工染色體在克隆較大的 DNA 片段方面很有用,因為質粒只能容納高達 10,000 個鹼基對,而噬菌體很難操作。人工染色體可以包含 300,000 (BAC) 到 1,000,000 (YAC) 個鹼基對,有效減少了分析大片段所需的執行次數。由於這些染色體在克隆更大的 DNA 片段方面更有用,因此克隆和轉化基因更容易、更快。人工染色體載體也使透過細菌細胞而不是哺乳動物細胞進行儲存更容易。

人工染色體有兩種型別:細菌人工染色體 (BAC) 和酵母人工染色體 (YAC)。雖然酵母人工染色體可以包含比細菌人工染色體更多的鹼基對(超過一百萬),但細菌人工染色體比酵母人工染色體更常見,因為它們更穩定,這使得它們更容易操作,並且由於質粒的圓形形狀,重排的風險更小。酵母人工染色體也可能產生嵌合效應,而細菌人工染色體則不會。

人工染色體的使用主要用於研究 DNA 片段。這是透過將非病毒/非細菌 DNA 整合到細菌染色體中,並在宿主中表達 DNA 片段來實現的。一旦表達,宿主細胞就會進行復制,因此包含整合 DNA 片段的宿主染色體將被複制。結果是包含片段化 DNA 的大量細菌菌落。換句話說,DNA 被克隆成數百萬個副本。人工染色體的使用徹底改變了生物學研究的各個方面。

參考文獻

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