結構生物化學/DNA 重組技術/基因組文庫
基因組文庫是指特定生物體的基因目錄。它們通常被稱為基因庫。為了建立基因組文庫，生物體的完整基因組被切割成片段並插入克隆載體中。它也可以指載體分子集合。
首先，使用多種限制性內切酶在特定鹼基對處進行切割，以建立所需的DNA片段。這些限制性內切酶的選擇方式應確保粘性末端與克隆載體相容，並且這些片段代表了完整的基因組。這也意味著克隆載體用相同的限制性內切酶進行切割，原始片段使用連線酶與克隆載體結合。然後將此混合物插入細菌細胞中以產生文庫。每個細胞將具有不同的DNA分子。透過識別重疊序列來存檔單個克隆的排序。此目錄的重疊序列集被稱為重疊群。
有了特定生物體的完整資訊庫，研究人員就可以對DNA進行各種實驗。透過這樣做，他們可以確定分離基因在鏈上的作用和相互作用。此外，他們可以比較同一物種的健康和不健康個體的基因組文庫，看看基因編碼的差異會導致哪些意外突變。
在現實中，人類的基因組文庫是一個細菌集合，最常見的是大腸桿菌。來自人類基因組的可利用DNA序列被轉移並透過大腸桿菌進行攜帶。DNA透過使用限制性酶消化來製備。然後，使用λ噬菌體將目標片段插入細菌中。這將建立一個基本的未擴增文庫，其中細菌被允許繁殖並建立每個DNA片段的額外副本。
