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酵母人工染色體 (YAC)

與細菌人工染色體 (BAC) 類似，酵母染色體可以在 DNA 克隆過程中用作宿主染色體。與 BAC 類似，YAC（酵母人工染色體）是合成染色體，其中整合了來自外源的 DNA 片段。YAC 與 BAC 之間的區別在於 YAC 不使用質粒，例如 E.Coli 中的 F 因子。相反，YAC 使用酵母染色體的特定區域。酵母染色體包含所有必要的複製部分，包括：著絲粒、端粒末端、DNA 位點標記、限制性內切酶 EcoRI 和 BamHI 以及複製起點。使用上述成分，可以將外源 DNA 片段拼接在端粒和著絲粒之間的任何區域。DNA 片段透過使用限制性內切酶 EcoRI 拼接。切割的 DNA 片段的範圍可以從 100 到 1000kb，因此 YAC 允許插入更大的 DNA 序列，這可以提高效率。在切割 DNA 片段後，酵母人工染色體也被兩種限制性內切酶消化；EcoRI 和 BamHI。然後在 EcoRI 位點重新組合這些片段，並透過 DNA 連線酶連線在一起，從而形成一個包含插入的 DNA 片段的新染色體。一旦外源 DNA 片段被拼接進入酵母染色體，DNA 複製就會開始，因為 DNA 聚合酶在細胞分裂/有絲分裂期間的複製起點部位開始延長 DNA 鏈。當宿主染色體延長時，外源 DNA 片段也隨之延長。這種方法的結果類似於使用 BAC，即大量的酵母細胞帶有片段化的 DNA。然後，酵母染色體中克隆的 DNA 片段可用於基因研究，例如基因作圖，或者簡單地放入基因庫以供進一步使用。