結構生物化學/蛋白質/純化結果分析
外觀
在每個純化步驟之後,溶液中存在的蛋白質型別預計會減少,而其比活性預計會增加。 這兩個特性是可取的,因為使用純蛋白質樣品進行的實驗可以得到更可量化的結果。 用於檢查樣品純度的一種方法是使用某種形式的凝膠電泳,例如 SDS-PAGE 或天然 PAGE。
純化也可以透過測量總蛋白、總活性、比活性、產量和純化水平來進行定量評估。 總蛋白是餾分中存在的蛋白質數量,可以透過測量每個餾分一部分的蛋白質濃度並乘以餾分的總體積來確定。 總活性是透過將測定中使用的餾分體積中的酶活性乘以餾分的總體積來測量的。 比活性是總活性除以總蛋白。 產率是每個純化步驟後保留的活性量。 純化水平是純度的增加,可以透過將每個純化步驟的比活性除以初始提取物的比活性來衡量。
一個好的純化過程需要考慮產量和純化水平。 高純化水平和低產量會帶來少量可供使用的蛋白質。 另一方面,低純化水平和高產量會導致實驗中存在汙染的蛋白質。